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植物可溶性糖檢測試劑盒說明書

點擊下載該文件    日期:2015/7/14 11:32:41

植物可溶性糖檢測試劑盒說明書


植物可溶性糖檢測試劑盒說明書
 
(規(guī)格:50T/48樣      蒽酮比色法)
一、測定意義:
糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的中藥組成成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)。總糖是指樣品中的還原單糖及在本法測定條件下能水解成還原丹堂的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉。
二、測定原理:
蒽酮比色法。可用于可溶性單糖,寡糖和多糖的含量測定,具有靈敏度高、簡便快捷、使用微量樣品的測定等優(yōu)點。
三、儀器設(shè)備:
可見分光光度計、沸水浴鍋、臺式離心機、微量移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、蒸餾水等。
四、試劑組成:(50T/48樣)
試劑一:粉劑x1瓶,4℃避光保存;
試劑二:10mLx1瓶,4℃保存;
工作液的配制:1瓶試劑一粉劑中加入5mL試劑二,充分溶解,如較難溶解,可適當加熱攪拌;配好的工作液4℃可保存一周。
五、操作步驟;
1、可溶性糖的提取:稱取0.1-0.2g樣本,加入1mL蒸餾水研磨成勻漿,倒入有蓋離心管中,沸水浴10min(蓋緊,管蓋上扎一個小孔,以減少水分散失),冷卻后,8000g,常溫離心10min,取上清液10mL試管中,用蒸餾水定容至10mL,搖勻備用。
2、操作表:
試管
空白管
測定管
樣本(uL)
 
200
蒸餾水(uL)
400
200
工作液(uL)
100
100
濃硫酸(uL)
1000
1000
混勻,置沸水浴(95-100℃)中10min(蓋緊,管蓋上扎一小孔,以減少水分散失),流水冷卻,波長620nm,測定各管吸光度值(A=A測定管-A空白管
注:1、空白管一般只做1-2管。
2、用A大于1,需要將樣品用蒸餾水稀釋后測定,計算時乘以相應(yīng)的稀釋管。
3、由于濃硫酸具有強腐蝕性,請謹慎操作;測定采用硬質(zhì)塑料離心管或者玻璃試管,若采用玻璃試管可用塑料薄膜封住試管口,并用薄膜上扎一個小孔維持氣壓并減少反應(yīng)液揮發(fā)。
六、計算公式:
1、保準條件下測定的回歸方程為為標準品濃度(mg/ml),y為吸光值。
2、按樣本鮮重量計算:
3、按樣本蛋白濃度計算:
注::加入樣本體積,0.2ml;
    :加入提取液體積,10ml;
    :樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;
     W:樣本重量;

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