鈣鹽染色試劑盒（Von Kossa硝酸銀法）
點擊下載該文件 日期：2015/6/23 15:08:45
產品簡介：
鈣在人體內大量存在，構成骨骼作為支持人體的支架，在分泌、運送、肌肉收縮、神經傳導等也起重要作用。鈣在機體內以兩種形式存在，一種是離子鈣，存在血液循環內，即所謂血鈣；另一種是結合鈣，和蛋白、碳酸或磷酸結合而沉著在組織內。除骨骼和牙齒外，正常時鈣滲透在所有組織和細胞中，一般丌以固體狀態出現在組織內。但在某些情冴下，鈣析出成固體并沉著于組織內，則為病理性鈣鹽沉著。沉著的鈣鹽主要是磷酸鈣，其次為碳酸鈣。鈣鹽通常是單折射的，但草酸鈣是雙折射的。當使用HE染色時，鈣一般呈紫藍色。許多染料可以于鈣形成螯合物，包括茜素紅 S、紅紫素、核固紅等。茜素紅S屬一種蒽醌類衍生物，是茜素磺酸鈉鹽，它能不碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復合物。
鈣鹽染色常用方法有硝酸銀法和茜素紅S法，Jisskang鈣鹽染色液采用Von Kossa硝酸銀法，其原理在于該法是一種金屬置換法，硝酸銀溶液作用于含有丌溶性鈣鹽的切片時，鈣被銀所置換，銀鹽在光的作用下被還原為黑色金屬銀，適用于大量樣本的鈣鹽組織染色。
自備材料：
1、10%中性福爾馬林固定液
2、系列乙醇
3、蒸餾水
4、顯微鏡
操作步驟(僅供參考)：
1、組織固定于10%中性福爾馬林，常規脫水包埋。
2、切片厚度 5μm，常規脫蠟至水。
3、蒸餾水洗 1min。
4、切片入Von Kossa硝酸銀溶液，強光照射15~60min(見注意事項2)。
5、蒸餾水洗 1min。
6、入海波溶液處理 2min。
7、HE染色液或Van Gieson復染細胞核。
8、常規脫水透明，中性樹膠封固。
染色結果：
鈣鹽：黑褐色至深黑色
細胞核：根據復染液不同而不同
背景：紅色
陰性對照：
1、如有必要，可做陰性對照。取另外一張連續切片脫蠟至水，置于Von Kossa對照液處理20min，流水沖洗 5min。不試驗片一同入Von Kossa硝酸銀溶液，余下步驟同上，結果為陰性。
注意事項：
1、鈣鹽組織固定以中性福爾馬林為佳，不宜采用 Bouin液等酸性固定液和甲醛鈣固定液。如用常規的 10%福爾馬林固定，固定4～6h后即可進行脫水包埋，以防止固定液酸化導致鈣鹽溶解。
2、作用時間取決于陽光照射時光的強度和時間。如暴露于強光下，15min已經足夠；如暴露于紫外燈下，10min即可；如暴露于一般光線下，宜適當延長曝光時間。
3、該染色法可以區分尿酸鹽和鈣鹽，其原理在于鈣鹽丌溶解于碳酸鋰溶液，尿酸鹽易溶解于碳酸鋰溶液，切片經碳酸鋰處理后，入硝酸銀溶液并置于強光下，尿酸鹽呈陰性反應。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期：6個月有效。
技術支持:阿儀網
