四虎影在线永久免费观看-四虎影院最新网址-四虎影院最新网站-四虎影院最新入口-四虎影院最新地址-四虎影院中文字幕

捷世康生物是一家專注于生命科學和生物技術領域的“新星”企業(yè),產品及代理品牌產品范圍涵蓋了分子生物學細胞生物學免疫學生物化學等生命科學相關領域及相關實驗室消耗品

品牌中心更多>>

熱賣產品

技術文獻

超氧陰離子(OFR)含量檢測試劑盒

點擊次數(shù):6515 日期:2021/6/21 14:46:46

超氧陰離子(OFR)含量檢測試劑盒
貨號:H0142

規(guī)格:50T/48S

注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

產品內容:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體32mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體25mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體25mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:氯仿,自備。    

亞硝酸鈉標準品:液體1mL×1支,4℃保存。10μmol/mL亞硝酸鈉。

產品說明:

生物體內超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號傳導的作用,但積累過多時會對細胞膜及生物大分子產生破壞作用,導致機體細胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。

超氧陰離子與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-在對氨基苯磺酰胺和萘乙二胺鹽酸鹽的作用下,生成紅色的偶氮化合物,在530nm有特征吸收峰,根據(jù)A530值可以計算樣品中O2-含量。

自備實驗用品及儀器:天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、氯仿和蒸餾水。

操作步驟

一、超氧陰離子提取

1.植物、動物組織:稱取約0.1g樣本,加入提取液1mL,充分研磨,12000rpm,4℃,離心20min,取20μL上清測定蛋白含量,其余上清作為待測樣本。

2.血清或培養(yǎng)液:直接測定

二、測定操作表

1、分光光度計預熱30min以上,調節(jié)波長至530nm,蒸餾水調零。

2、標準溶液的制備

稱取適量亞硝酸鈉標準液,首先16倍稀釋至 0.625µmol/mL,然后進行倍比稀釋至 0.3125、0.15625、 0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.0049、0.00244、0.0012、0.0006µmol/mL 梯度稀釋的標準溶液, 用0.3125、0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.009765、0.00244、0.0006µmol/mL 標準管做標準曲線。

3、操作表

 

空白管

測定管

標準管

標準溶液(mL)

 

 

0.2

樣本(mL)

 

0.2

 

提取液(mL)

0.5

0.3

0.3

試劑一(mL)

0.4

0.4

0.4

混勻,37℃水浴20min

試劑二(mL)

0.3

0.3

0.3

試劑三(mL)

0.3

0.3

0.3

混勻,37℃水浴 20min

試劑四(mL)

0.5

0.5

0.5

混勻,8000rpm,25℃,離心 5min,小心吸取上層水相 1mL,蒸餾水調零,

1mL 玻璃比色皿,測定 A530。計算∆A 標準=A 標準管-A 空白管,∆A 樣品=A 測定管-A 空白管。每次實驗空白管僅需做一管。

三、超氧陰離子含量計算公式

1.標準曲線的繪制

∆A 標準為 y 軸,標準溶液濃度為 x 軸,繪制標準曲線 y=kx+b

2.超氧陰離子含量的計算

∆A 樣品帶入方程得到 x 值(µmol/mL)

(1) 按照樣本鮮重計算

超氧陰離子含量(µmol/g鮮重)= 2x×V 樣本÷(V 樣本÷V 提取×W)=2x÷W。

超氧陰離子產生速率(µmol/ min/g鮮重)= 2x×V 樣本÷(V 樣本÷V 提取×W)÷T=0.1x÷W。

(2) 按照蛋白質濃度計算

超氧陰離子含量(µmol/min/mg prot)= 2x×V 樣本÷(V樣本×Cpr)=2x÷Cpr。

超氧陰離子產生速率(µmol/min/mg prot)= 2x×V樣本÷(V 樣本×Cpr)÷T=0.1x÷Cpr。

(3) 按照血清或培養(yǎng)液體積計算

超氧陰離子含量(µmol/mL)= 2x

超氧陰離子產生速率(µmol/min/mL)= 2x÷T=0.1x。

V 樣本:參與反應樣本體積,0.2mL;V提取:提取過程中加入的提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣品鮮重,g;T:反應時間,20min。

超氧陰離子(OFR)含量檢測試劑盒注意事項:

1、OD值大于1.0,樣品適當稀釋再測定,注意計算公式里乘以稀釋倍數(shù)。

2、樣品制備好之后,立刻進行測定,請勿將樣品進行長時間的低溫保存,以免影響測定結果。

3、試劑四有一定的毒性,請操作時做好防護措施。

原創(chuàng)作者:青島捷世康生物科技有限公司

掃一掃,關注手機網(wǎng)站!!!

收縮
請掃一掃!
主站蜘蛛池模板: 天天av天天翘天天综合网| 国产午夜不卡| 成人榴莲视频| 日本噜噜影院| 亚洲成av人片天堂网| 人妖三级| 国产日韩在线| 天堂8在线天堂资源bt| 成年人免费在线看的惊悚动作片| 饭冈加奈子在线播放观看| 欧美 变态 另类 人妖班| 国产青青操| 亚洲视频国产精品| 99亚洲| 魔镜号中文字幕| 久见久热 这里只有精品| 韩国美女激情vip| 我和么公的秘密小说免费 | 日韩制服丝袜在线观看| 精品精品国产自在久久高清| 欧美亚洲国产综合在线| 爱色综合v| 美女乳液| 久久草福利自拍视频在线观看| 久久视热频国产这里只有精品23 | 果冻传媒天美传媒网址入口| 日韩在线视频在线| 4虎tv| 亚洲国产中文字幕在线视频综合| 天天碰夜夜操| 韩国禁片在线观看久| 国内精品久久久久久久| 91污污视频| 妹妹你插的我好爽| 好猛好紧好硬使劲好大刺激视频| 污污免费| 亚洲29p| 天天做日日爱| 99热视频| 91国产在线观看| 成人在线观看免费视频|