細菌的人工培養

人工培養細菌是根據細菌的生理需求和繁殖規律，用人工方法提供給細菌所需的各種條件下培養細菌。這對細菌感染性疾病的診治及生物制品的研制等具有重要意義。

一、培養基

培養基時人工培植的適合細菌生長繁殖的營養物制品，培養基的PH值一般為7.2-7.6，經滅菌后才能使用。根據培養基用途不同可將培養基分為以下幾種：

（1）基礎培養基：含有細菌生長繁殖所需的基本營養物質，最常用的是肉湯培養基，即在牛肉浸液中加入適量的蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽、調節PH值為7.2-7.6，經滅菌處理后可供大多數細菌培養用。

（2）營養培養基：在基礎培養基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸液等營養物質，供營養要求高的細菌生長。

（3）選擇培養基：在培養基中加入某些化學化學物質，以抑制某些細菌生長，而有利于另一類細菌生長繁殖，從而將后者從混雜的細菌群眾選擇分離出來。如SS瓊脂培養基中的膽鹽、煌綠等可疑值革蘭陽性菌和大腸埃希菌，從而可以從糞便中分離出沙門菌和志賀菌。

（4）鑒別培養基：在培養基中加入特定的單糖和氨基酸作為底物和相應的指示劑，觀察細菌再次培養基中是否能分解這些糖或氨基酸產生不同物質，從而鑒別細菌，如伊紅亞甲藍培養基、糖發酵管等。

（5）厭氧培養基：專供厭氧菌的分離培養和鑒定用的培養基。例如，在培養基中加入肉渣等還原劑的苞肉培養基，并用液狀石蠟或凡士林封口，隔絕空氣，使培養基內稱為無氧環境。

根據培養基物理性狀不同可將其分為液體、半固體和固體培養基三大類。液體培養基常用語細菌的增菌培養和細菌的鑒定；在液體培養基中加入0.2%-0.5%的瓊脂即制成半固體培養基，常用語保存菌種及細菌動力觀察；若加入2%-3%的瓊脂即制成固體培養基，常用語分離細菌和保存菌種。

二、細菌在培養基中的生長現象

（一）細菌在液體培養基上的生長現象

細菌在液體培養基中可呈三種生長狀態：①渾濁生長：大多數細菌在液體培養基中生長后呈均勻渾濁狀態，如葡萄球菌。②沉淀生長：少數呈鏈狀生長的細菌或粗糙型細菌在液體培養基底部形成沉淀，培養液較清，如鏈球菌。③菌膜生長：專性需氧性細菌在液體培養基表面形成菌膜，如枯草桿菌。臨床用的澄清透明的注射液如果發現上述任何一種現象，均表明已被細菌污染，禁止使用。

（二）細菌在半固體培養基上的生長現象

半固體培養基瓊脂含量少而較軟，有鞭毛的細菌可沿著穿刺線向四周擴散，呈羽毛狀或云霧狀渾濁生長；無鞭毛的細菌在半固體培養基上只能延穿刺線呈明顯的現狀生長，周圍培養基基本透明澄清。常用于細菌動力觀察。

（三）細菌在固體培養基上的生長現象

細菌在固體培養基上課形成菌落或菌苔。吧細菌劃線接種到固體培養基表面，一般經過37℃18-24h培養，單個細菌就可以生長繁殖呈肉眼可見的細菌集團，稱為菌落（Colony)。不同的細菌形成的菌落大小、形狀、顏色、透明度、表面光滑或粗糙、邊緣整齊及溶血情況各有差異，其特征可以作為細菌鑒別的中藥依據。菌落一般分為兩種類型①光滑型菌落：表面光滑、濕潤、邊緣整齊。②粗糙型菌落：表面粗糙、干燥、邊緣不整齊。講一個菌落挑取移種到另一個培養基中，生長出來的細菌為純種，稱為純培養，用于細菌的鑒定。許多菌落融合在一起形成菌苔（lawn）。

三、人工培養細菌的試劑意義

（一）在醫學中的應用

1、病原菌的細菌學研究 在進行病原菌的細菌學研究時，必須首先經純培養得到初中細菌才能作為研究的材料。

2、感染性疾病的病原學診斷和治療 對患者標本中分離并將定出病原菌是診斷感染性疾病的最可靠指標，病原菌的藥物敏感試驗對臨床選擇有效的抗生素治療具有指導意義。

3、生物制品的制備 人工分離培養所得的純細菌及其代謝產物，可制備疫苗、類毒素、診斷出標準菌液、或經類毒素、純細菌免疫動物后制備抗毒素、及診斷血清、用于傳染性疾病的診斷、預防劑治療

（二）其他方面的應用

    利用細菌的培養和發酵，可提純精制的抗生素、維生素醇類、醬油、未經等產品，還可用于是由脫蠟，污水處理，制造菌肥等。利用細菌繁殖快、以培養的特點，可將細菌作為基因受體細胞，如將人或動物細胞中編碼胰島素的基因從組到質粒上，再倒入大腸埃希菌，就能從大腸埃希菌的培養液中獲得大量基因工程胰島素。

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