山梨醇含量試劑盒說明書
分光光度法 50管/48樣
測定意義：
山梨醇廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，不僅是糖運輸形式之一，而且與生物
抗逆性和食物風味密切相關。因此，在糖代謝、抗逆性和食品研究中經常需要檢測山梨醇含
量變化。
測定原理：
山梨醇在堿性溶液中與銅離子形成藍色絡合物，在655nm波長有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體10mL×1瓶，4℃保存。
山梨醇的提取：
按照組織質量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.2g組織，加入2mL
蒸餾水），研磨成勻漿，置沸水浴中煮沸10分鐘（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后，8000g，
常溫離心10min，取上清液待測。
測定步驟
1、分光光度計預熱30min以上，調節波長至655nm，蒸餾水調零。
2、加樣表（在 EP管中依次加入下列試劑）：
試劑（μL） 空白管 測定管
試劑 150 150
試劑二 140 140
樣本 1000
蒸餾水 1000
混勻后室溫靜置15min，8000g，常溫離心10min，取上清液測655nm下吸光值A，計算ΔA=A
測定管-A空白管。空白管只要做一管。
山梨醇含量計算：
1、標準條件下測定回歸方程為 y = 0.352x - 0.002；x為標準品濃度（mg/mL），y為吸光值。
2、按照樣本質量計算
山梨醇含量（mg /g鮮重）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA＋0.002) ÷W
3、按照樣本蛋白濃度計算
山梨醇含量（mg /mg prot）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA＋0.002) ÷Cpr
V1：加入樣本體積，1mL；V2：加入提取液體積，2 mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；
W：樣本質量，g
原創作者：青島捷世康生物科技有限公司
技術支持:阿儀網
