環(huán)境因素對熒光強度的影響
溶液中的環(huán)境因素對分子熒光可能產(chǎn)生強烈的應先，了解和利用這一重要因素，可以提高熒光分析的靈敏度和選擇性。 溫度對溶液的熒光強度有顯著的影響。在一般強狂下，隨著溫度的升高，溶液中的熒光物質在熒光效率和熒光強度將降低。這是因為，當溫度升高時，分子運動速度加快，買分子碰撞幾率增加，使無輻射躍遷增加，從而降低了熒光效率。如熒光鈉素的乙醇溶液，在0℃一下溫度每降低10℃，熒光量子產(chǎn)率約增加3%,冷卻至-80℃時，熒光量子產(chǎn)率接近100%.
同一種熒光體在不同的溶劑中，其熒光光譜的形狀和強度都可能會有顯著的差別。一般情況下，熒光波長隨著溶劑的極性的增大而長移，熒光強度也有所增強。這是因為在急性溶劑中π-π
躍遷所需的能量差△E小，而且躍遷幾率增加，從而使紫外吸收波長和熒光波長均移，強度液增強。 溶劑粘度減小時，可以增加分子間碰撞機會，使無輻射躍遷增加而熒光減弱，故熒光強度隨溶劑粘度的減小而減弱。
計入熒光物質是一種弱酸式弱堿，溶液的PH值改變將對熒光強度產(chǎn)生很大的影響。這主要是因為弱酸、弱堿分子和他們的離子結構有所不同，在不同酸度中分子和離子間的平衡改變，因此熒光強度也有差異。每一種熒光物質都有它最適宜的發(fā)射熒光的存在形式，依舊是有其最適宜的ph值范圍。例如，苯胺在不同PH值下有下列平衡關系
苯胺在ph7-12的溶液中主要以分子形式村子，由于-NH2為提高熒光效率的取代基，故苯胺分子會發(fā)生藍色熒光。在PH＜2和ph＞13的溶液中均可苯胺離子形式存在，故不能發(fā)射銀光。
當一束平行光照射的溶液樣品上，大部分光線透過溶液，小部分由于光子和物質分子相碰撞。使光子的運動方向發(fā)生改變而向不同角度散射，這種光稱為散射光（scattering light)。
光子和物質分子放生了彈性碰撞時，不發(fā)生能量的交換。僅僅是光子運動方向發(fā)生改變，這種散射光叫做瑞利光，其波長與入射光波長相同。
光子和物質分子放生非彈性碰撞時，在光子運動方向發(fā)生改變的同時，光子和物質分子發(fā)生能量交換，光子把不封能量轉給物質分子或物質分子獲得部分能量，而發(fā)射出比入射光波長稍長或燒斷的光，這兩種光均為拉曼光。
散射光對熒光測定有干擾，尤其是波長比入射光波長更長的拉曼光，引起波長與熒光波長接近，對熒光測定的干擾更大，必須采取措施消除。
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